PSMA-617是一種可以特異性與PSMA結(jié)合的抑制劑，PSM-617結(jié)合放射性元素被用于前列腺癌的放射性成像。通常來說，抑制劑不僅可以起到抑制作用，而且同時具有識別標記的功能，因此我們利用PSMA-617這種抑制劑識別PSMA。由于dSTORM需要特殊的光閃爍染料，我們在抑制劑上連接一種通用的dSTORM染料TAMRA，合成一種可以特異性識別PSMA的超分辨成像探針。相比于傳統(tǒng)的圖像（如圖1a），超分辨圖像顯示出PSMA在細胞膜上亞衍射極限的分布情況（如圖1b），為了確保較高的分辨率，F(xiàn)RC方法測量了獲得的超分辨圖像的分辨率，從藍色到紅色，數(shù)值越來越大，代表分辨率越來越低，圖中顯示出最高分辨率約為30 nm（如圖1c）。此外，為了估測抑制劑是否能特異性標記細胞膜PSMA，我們同時用抗體和抑制劑探針標記PSMA，進行雙色成像，圖中2a顯示抑制劑探針和抗體有一個比較高的重合，共定位系數(shù)CBC值在1處有最高峰，代表這兩種探針有較高的共定位，說明抑制劑探針可以特異性識別細胞膜上的PSMA。更重要的是，基于抑制劑發(fā)展的探針對于在單分子水平上觀察細胞膜蛋白是可行的。
 
     如圖1. 細胞膜PSMA的傳統(tǒng)的TIRF圖像（a），dSTORM超分辨圖像（b）及對應(yīng)的FRC圖像（c）。超分辨圖像顯示了更清晰的PSMA分布。分塊的傅里葉環(huán)相關(guān)系數(shù)分布圖顯示出最高分辨率為30 nm。
 
如圖2. 抑制劑探針和抗體的雙色成像。（a）Alexa 647連接的抗體探針和TAMRA連接的抑制劑探針同時標記細胞膜上PSMA。微球校正x-y漂移和紅綠通道之間的光學(xué)配準。圖中標尺為5 μm。（b）用CBC分析了共定位參數(shù)。